amplifikace a nadměrná exprese TOP2A v tkáních hepatocelulárního karcinomu

Abstrakt

hepatocelulární karcinom (HCC) je hlavní příčinou úmrtí na rakovinu u mužů po celém světě kvůli omezenému pohledu na patogenezi a neuspokojivé účinnosti současných terapií. Geny HER2 a TOP2A jsou koampifikovány v prsu a některých dalších rakovinách. V této studii, zkoumali jsme genové aberace HER2 a TOP2A a proteinové exprese HER2, TOP2A, Ki-67, a p53 v nádorových a odpovídajících netumorových tkáních, stejně jako jejich asociace s klinicko-patologickými rysy. Genové aberace byly hodnoceny pomocí exprese ryb a bílkovin pomocí IHC. Nadměrná exprese HER2 ani amplifikace genu HER2 nebyly pozorovány jak v nádorových tkáních, tak v odpovídajících netumorových tkáních. Naproti tomu nadměrná exprese TOP2A byla detekována u 72,5% nádorových tkání, ale nebyla detekována v odpovídajících netumorových tkáních. Amplifikace genu TOP2A však nebyla pozorována jak v nádorových, tak v odpovídajících netumorových tkáních. Nadměrná exprese TOP2A byla významně spojena s nádorovými tkáněmi HCC (P < 0, 001), povrchovým antigenem hepatitidy B (HBsAg) v séru (P = 0, 004) a Ki-67 (P = 0.038), ale ne s věkem, velikostí nádoru, alfa-fetoproteinem, TP53 a počtem kopií genu TOP2A a centromery chromozomu 17. Závěrem lze říci, že nadměrná exprese TOP2A v HCC nebyla sekundární k amplifikaci genů. Navíc ani amplifikace HER2 ani nadměrná exprese nemohly být použity jako prognostický a prediktivní marker v HCC.

1. Úvod

rakovina jater je druhou hlavní příčinou úmrtí na rakovinu u mužů na celém světě . Mezi primárními karcinomy jater je hepatocelulární karcinom (HCC) celosvětově hlavním histologickým podtypem, přičemž 78% HCC lze přičíst viru hepatitidy B (HBV, 53%) nebo viru hepatitidy C (HCV, 25%) . HCC je typicky agresivní nádor vyplývající z chronického onemocnění jater a jaterní cirhózy. Prognóza HCC zůstává skličující. Většina pacientů s HCC není kandidátem na léčebné terapie (chirurgická resekce nebo transplantace jater) v důsledku pokročilého nebo neresekovatelného onemocnění při prezentaci a dostupné terapeutické možnosti zahrnují lokální nechirurgické metody ablace nádoru a systémová terapie.

některé onkogeny, včetně lidského epiteliálního růstového faktoru receptor-2 (HER2) a topoizomerázy II alfa (TOP2A), byly zkoumány v různých podtypech rakoviny jako cíle pro léčbu rakoviny, stejně jako biomarkery pro predikci odpovědi. Gen HER2 je protoonkogen umístěný na chromozomu 17 (17q11. 2-q12) a kóduje transmembránový tyrosinkinázový receptor 185 kDa . Amplifikace genu HER2 u karcinomu prsu se stala důležitým biomarkerem pro predikci odpovědi na terapii zaměřenou na HER2 . Role statusu genu HER2 a exprese proteinu HER2 v HCC však byla kontroverzní . Gen TOP2A se nachází na chromozomu 17 (17q21-q22), při asi 700 kb telomerním lokusu genu HER2 . Gen TOP2A kóduje 170 kDa jaderný enzym, který řídí topologickou strukturu DNA, segregaci chromozomů a progresi buněčného cyklu . Protein TOP2A je zaměřen několika chemoterapeutickými látkami, jako jsou antracykliny (doxorubicin, epirubicin) a epipodofylotoxiny(etoposid, teniposid). Gen TOP2A je koampifikován s genem HER2 u přibližně 35% karcinomů prsu amplifikovaných HER2 a KOAMPIFIKACE TOP2A, nikoli amplifikace HER2, je prediktivním markerem přírůstkové odpovědi na chemoterapii založenou na antracyklinech u karcinomů prsu amplifikovaných HER2 . Zvýšená hladina mRNA a proteinu TOP2A, byla detekována v HCC, ale zůstává nejasné, zda nadměrná exprese TOP2A v HCC vznikla z amplifikace genu TOP2A. Kromě toho žádná předchozí studie nezkoumala, zda v HCC existuje KOAMPIFIKACE TOP2A a HER2. Proto, abychom určili souvislost mezi amplifikací TOP2A/HER2 a nadměrnou expresí TOP2A / HER2 v HCC, zkoumali jsme genové číslo kopie HER2 i TOP2A fluorescenční in situ hybridizací (FISH) a proteinové exprese HER2, TOP2A, stejně jako Ki-67 a nádorového proteinu p53 (TP53) imunohistochemickým barvením (IHC). Poté byly statisticky analyzovány asociace těchto genových stavů a proteinových expresí s klinicko-patologickými rysy.

2. Materiály a metody

2.1. Nádorové a odpovídající-nádorové vzorky

čtyřicet párů hepatocelulárního karcinomu (HCC) a netumorových tkání od stejných pacientů bylo získáno chirurgickou resekcí z operačních sálů, oddělení chirurgie, Nemocnice Ramathibodi. Tkáně byly zmrazeny při -80°C. zmrazené řezy byly připraveny a obarveny hematoxylinem a eosinem (H& E). Histologické snímky obarvené H& E byly přezkoumány zkušeným patologem. Vzorky byly mapovány těmito diapozitivy H&E, takže byly vybrány nádorové a odpovídající netumorové oblasti pro přípravky izolovaných jader a pro test IHC. Tato studie byla schválena etickou komisí pro výzkum zahrnující lidské subjekty Lékařské fakulty, Nemocnice Ramathibodi, Mahidol University.

2.2. Příprava izolovaných jader pro rybí test

dvacet dva párů zmrazeného nádoru a odpovídajících netumorových tkání bylo k dispozici pro přípravu izolovaných jader pro rybí test. Izolovaná jádra byla připravena dříve uvedenou metodou . Krátce byly vybrané vzorky tkáně inkubovány v 500 µL 0,9% NaCl pH 1,5 po dobu 1 hodiny při 37°C, s občasným vířením. Suspenze tkání byly promyty PBS (fosfát pufrovaný fyziologický roztok) a napjaty přes buněčné sítko (BD Falcon, USA). Izolovaná jádra byla fixována v Carnoyově fixativu (3: 1 methanol: kyselina octová). Preparáty na sklíčka byly vyrobeny tak, že se 8 µL suspenze z každého jádra upustí na skleněné sklíčka a potom se suší v sušárně o teplotě 65°C po dobu 15 minut. Přípravky byly udržovány při -20°C až do použití.

2.3. FISH Assay

amplifikace genu HER2 a TOP2A byla hodnocena fluorescenční in situ hybridizací pomocí PathVysion HER-2 dna probe kit a TOP2A DNA probe kit (Vysis Inc., Downers Grove, Illinois, USA), podle postupu stanoveného výrobcem s následujícími úpravami. Krátce byla sklíčka inkubována v 2XSSC při 75°C po dobu 20 minut. Sklíčka byla poté štěpena pepsinem (4 mg/mL v 0,9% NaCl, pH 1,5) po dobu 5 minut, ponořena do vody a opláchnuta 2XSSC při pokojové teplotě po dobu 5 minut. Sonda a cílová DNA byly kodenaturovány při 80°C po dobu 5 minut a hybridizovány ve vlhkostní komoře přes noc při 37°C. po hybridizaci byly krycí sklíčka jemně odstraněna a sklíčka byla promyta 0,4 XSSC/0,3%NP-40 při 73°C po dobu 2 minut. Sklíčka byla poté přenesena na 2XSSC/0,1% NP-40 při pokojové teplotě po dobu 1 minuty. Jádra byla kontrastována s DAPI II (Vysis Inc., Downers Grove, Illinois, USA). Signály byly počítány pod fluorescenčním mikroskopem (Olympus BX61) vybaveným 100 W rtuťovou lampou. Pro zobrazení signálů byly použity filtry s jedním pásmem pro spectrum green, spectrum orange a DAPI. Z většiny vzorků bylo zaznamenáno nejméně 100 mezifázových jader. Status HER2 byl stanoven podle pokynů ASCO / CAP . HER2 / centromera chromozomu 17 (HER2/CEP17) menší než 1,8 byl považován za HER2 negativní (HER2 neamplifikovaný), HER2/cep17 poměr mezi 1,8 a 2,2 jako HER2 nejednoznačný a HER2/cep17 poměr vyšší než 2,2 jako HER2 pozitivní (HER2 amplifikovaný). Amplifikace genu TOP2A byla definována jako poměr TOP2A / CEP17 ≥2.0, zatímco delece TOP2A byla definována jako poměr TOP2A/CEP17 ≤0,8. Případ byl považován za normální, když poměr TOP2A/CEP17 byl mezi 0, 8 a 2, 0. Zisk centromery chromozomu 17 byl definován jako průměrný CEP17 ≥3 . Snímky jader byly zachyceny softwarem Cytovision (Leica, UK).

2.4. IHC test

čtyřicet párů nádorových a odpovídajících netumorových tkání bylo fixováno v 10% pufrovaném formalinu a poté zpracováno a vloženo do parafínu. Sériové 4-mikronové úseky byly vyříznuty a umístěny na kladně nabité sklíčka. Sklíčka byla deparafinizována v xylenu a hydratována odstupňovanými koncentracemi ethanolu a nakonec destilovanou vodou. Odběr antigenu byl proveden v této fázi s 10 mM citrátovým pufrem, pH 6,0, v tlakovém hrnci. Sekce byly poté zpracovány pomocí systému detekce hodnot UltraVision LP (Lab Vision, USA). Stručně řečeno, sekce byly blokovány blokádou peroxidu vodíku po dobu 15 minut při pokojové teplotě, následovaný blokem Ultra v po dobu 10 minut při pokojové teplotě. Primární protilátka každého markeru byla aplikována v optimalizovaném ředění a inkubační době, jak je uvedeno v tabulce 1. Sekce byly inkubovány s hodnotou primární protilátky Enhancer po dobu 30 minut při pokojové teplotě; pak, hodnota HRP Polymer byl aplikován a řezy byly inkubovány po dobu 1 h při pokojové teplotě. DAB (3, 3′ – diaminobenzidin) byl použit jako substrát k odhalení exprese každého markeru. Diapozitivy byly kontrastovány hematoxylinem a namontovány v trvalém montážním médiu. Tkáně s vynecháním specifické protilátky byly použity jako negativní kontroly. Snímky byly skenovány pomocí digitálního diapozitivu Pannoramic MIDI (3dhistech, Maďarsko).

2.5. Interpretace barvení IHC

podle pokynů ASCO / CAP byla exprese HER2 hodnocena následovně: 0, žádné barvení; 1+, slabé a neúplné membranózní barvení v >10% nádorových buněk; 2+, slabé až střední, úplné membranózní barvení v >10% nádorových buněk; 3+, silné, úplné membranózní barvení v >30% nádorových buněk.

mezní hodnotou pro pozitivitu nádorového proteinu p53 (TP53) bylo barvení p53 s pozitivními jádry v ≥1% buněk, bez ohledu na intenzitu barvení. Index proliferace Ki-67 a exprese TOP2A byly hodnoceny vizuálním odhadem procenta pozitivních jader v tkáních. Index proliferace Ki-67 ≥10% byl definován jako Ki-67 pozitivní. Exprese TOP2A ≥10% byla imunohistochemicky definována jako nadměrná exprese TOP2A.

2.6. Sérový test povrchového antigenu hepatitidy B (HBsAg)

chemiluminiscenční mikročásticové imunoanalýzy (CMIA) pro kvalitativní detekci povrchového antigenu hepatitidy B (HBsAg) v séru od pacientů byly provedeny pomocí kvalitativního testu ARCHITECT HBsAg II (Abbot Laboratories, Illinois, USA).

2.7. Sérový alfa-Fetoprotein (AFP) test

Elektrochemiluminiscenční imunoanalýzy (ECLIA) pro kvantitativní stanovení alfa-fetoproteinu (AFP) in vitro v séru od pacientů byly provedeny pomocí sady AFP s analyzátorem cobas e601 (Roche Diagnostics Limited GmbH, Mannheim,GM).

2.8. Statistické analýzy

statistické analýzy byly provedeny pomocí SPSS v. 11. 5 (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA). Asociace mezi expresí TOP2A a dalšími klinicko-patologickými proměnnými byla stanovena pomocí testu chí-kvadrát (test). Hodnoty menší než 0.05 byly považovány za statisticky významné.

3. Výsledky

3.1. Klinické patologické rysy

do této studie bylo zařazeno čtyřicet pacientů (35 mužů, 5 žen; věkové rozmezí 35-94 let, medián 51 let) s resekovatelným hepatocelulárním karcinomem. Klinikopatologické rysy jsou shrnuty v tabulce 2. Šedesát pět procent pacientů mělo velikost nádoru větší nebo rovnou 5 cm. Přítomnost HBsAg v séru byla zjištěna u 70% pacientů. Třicet dva procent pacientů s hodnotami sérového alfa-fetoproteinu (AFP)vyššími nebo rovnými 500 ng / ml. Pozitivní exprese TP53 a Ki-67 v tkáních HCC byla zjištěna u 45% a 75%.

3.2. Association of HER2 Gene Status and Protein Expression

HER2 protein overexpression was investigated in 40 pairs of tumor and matched nontumor tissues; Amplifikace genu HER2 byla zkoumána ve 22 párech tkání. Výsledky ukázaly, že v nádorových tkáních a odpovídajících netumorových tkáních nebyla detekována nadměrná exprese HER2 ( páry) ani amplifikace genu HER2 ( páry). Kromě toho byla delece genu HER2 (poměr HER2/cep17 ≤0,8) detekována u 9% (2/22) nádorových tkání a zisk centromery chromozomu 17 (CEP17 ≥ 3) byl pozorován u 50% (11/22) nádorových tkání. Reprezentativní zisk CEP17 a jeho negativní exprese HER2 v nádorové tkáni jsou znázorněny na obrázku 1.

(a)

(b)

(c)

(d)

(a)
(b)
(c)
(d)

Obrázek 1

reprezentativní číslo kopie HER2 (červený signál) a CEP17 (zelený signál) detekované FISH a exprese proteinu HER2 detekovaná IHC. a) zisk CEP17 s neamplifikovaným HER2 v případě 34, Původní zvětšení ×1000. b) HER2 negativní vyjádření v případě 34. (c) amplifikace HER2 v tkáni rakoviny prsu (pozitivní kontrola, Původní zvětšení ×1000). (d) exprese proteinu HER2 pozitivní 3+ v tkáni karcinomu prsu (pozitivní kontrola, stejný případ jako (c)).

3.3. Asociace stavu genu TOP2A a exprese proteinu

nadměrná exprese top2a proteinu byla zkoumána ve 40 párech nádorových a odpovídajících netumorových tkáních; amplifikace genu TOP2A byla zkoumána ve 22 párech tkání, které byly také použity pro studii amplifikace genu HER2. Výsledky stavu genu TOP2A jsou však dostupné pouze ve 20 nádorových tkáních a 18 odpovídajících netumorových tkáních. Nadměrná exprese TOP2A byla detekována u 72,5% (29/40) nádorových tkání, ale nebyla detekována v netumorových tkáních. Amplifikace genu TOP2A však nebyla detekována jak v nádorových tkáních, tak v odpovídajících netumorových tkáních. Kromě toho byla delece genu TOP2A (poměr TOP2A/cep17 ≤0,8) současně s delecí genu HER2 (poměr HER2 / cep17 ≤0,8) pozorována u 10% (2/20) nádorových tkání. Jedna z nádorových tkání s delecí genu TOP2A vykazovala nadměrnou expresi TOP2A (případ 32), zatímco druhá nádorová tkáň nevykazovala expresi TOP2A (případ 34). Nesoulad mezi číslem kopie genu TOP2A a expresí proteinu TOP2A je znázorněn na obrázku 2. Zisk centromery chromozomu 17 (CEP17 ≥ 3) byl zjištěn u 60% (12/20) nádorových tkání.

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)

Obrázek 2

nesoulad mezi genem TOP2A (TOP2A, červený signál; CEP17, zelený signál) číslo kopie detekované exprese FISH a top2a proteinu (hnědý signál) detekované IHC v případech HCC. a) případ 34: výsledek ryby ukázal deleci TOP2A (poměr = 0,65, Původní zvětšení ×1000) a negativní expresi TOP2A, jak je znázorněno v písmenu b). c) případ 32: výsledek ryby ukázal deleci TOP2A (poměr = 0,64, Původní zvětšení ×1000) a nadměrnou expresi TOP2A (30%), jak je uvedeno v písmenu d). e) případ 25: výsledek ryby ukázal normální TOP2A (poměr = 1,07, Původní zvětšení ×1000) a nadměrnou expresi TOP2A (90%), jak je znázorněno v písmenu f).

3.4. Asociace exprese proteinu TOP2A a dalších klinicko-patologických rysů

nadměrná exprese TOP2A byla detekována u 72,5% (29/40) nádorových tkání a významně spojena s tkáněmi HCC (); jinými slovy, byla nalezena pouze v nádorových tkáních HCC. Kromě toho byla nadměrná exprese TOP2A v nádorových tkáních také významně spojena s HBsAg v séru () a expresi Ki-67 (). Nicméně neexistovala žádná významná souvislost nadměrné exprese TOP2A s věkem, velikostí nádoru, expresí AFP, TP53, číslem kopie CEP17 a číslem kopie genu TOP2A, jak je ukázáno v tabulce 3.

4. Diskuse

v této studii mělo 65% pacientů velikost nádoru ≥5 cm, což naznačuje, že tito pacienti s HCC byli diagnostikováni v pozdějším stádiu, a také 70% pacientů mělo HBV asociovaný HCC, jak je indikováno přítomností HBsAg v séru. Také jsme zjistili, že tyto tkáně HCC často exprimovaly TP53 (45%) a Ki-67 (75%), podobně jako předchozí zprávy . Bylo hlášeno, že prevalence HBV a frekvence exprese TP53 jsou vyšší u asijských pacientů s HCC než u amerických pacientů s HCC .

amplifikace a nadměrná exprese HER2 se vyskytují u několika rakovin včetně karcinomů prsu, vaječníků, endometria a pankreatu . Nadměrná exprese HER2 je obvykle výsledkem amplifikace genu HER2. Kromě toho je amplifikace HER2 a nadměrná exprese spojena se špatnou prognózou u karcinomu prsu a stala se nezbytným prediktivním biomarkerem pro odpověď na terapii zaměřenou na HER2 . Naproti tomu zkoumání stavu a exprese genu HER2 v HCC přineslo různé výsledky. Ačkoli některé studie uváděly, že HER2 je amplifikován a nadměrně exprimován v tkáních HCC, Xian et al. a Bacaksiz et al. dospěl k závěru, že nadměrná exprese a amplifikace HER2 je u HCC neobvyklá. Hsu a kol. také bylo hlášeno, že nadměrná exprese HER2 je vzácná u pacientů s pokročilým HCC. Naše výsledky však ukázaly, že HER2 nebyl amplifikován ani nadměrně exprimován v nádorových tkáních a odpovídal netumorovým tkáním, což je v souladu s výsledkem Vlasoff et al. . Naše výsledky dále ukázaly, že průměrný počet kopií centromery chromozomu 17 (CEP17) byl významně vyšší v nádorových tkáních než v odpovídajících netumorových tkáních ( versus,), ale zisky CEP17 v HCC nebyly spojeny s nadměrnou expresí HER2. To je v souladu s naší předchozí studií v tkáních rakoviny prsu, že při absenci amplifikace HER2 nemají zisky CEP17 významný vliv na expresi HER2 . Vzhledem k jeho vzácnosti nebo nepřítomnosti jsme dospěli k závěru, že ani amplifikace HER2 ani nadměrná exprese nemohou být běžně používaným prognostickým a prediktivním markerem u hepatocelulárního karcinomu.

Gen TOP2A kóduje 170 KDa jaderný enzym kontrolující topologickou strukturu DNA a je často koampifikován s genem HER2 u rakoviny prsu a rakoviny močového měchýře. Amplifikace genu TOP2A a delece TOP2A byla nalezena u 35% a 5% HER2-amplifikovaného karcinomu prsu; avšak pouze delece genu TOP2A mohla být detekována u 3% HER2 neamplifikovaného karcinomu prsu . Bylo hlášeno, že koampifikace HER2 a TOP2A u karcinomu prsu je spojena s citlivostí na antracyklin . Top2a koampifikace u HER2-amplifikovaného karcinomu prsu může způsobit zvýšenou citlivost na inhibitory TOP2A indukcí nadměrné exprese proteinu TOP2A . Dále bylo hlášeno, že exprese TOP2A je cenným prognostickým markerem pro pokroky nádorů, recidivy a prediktor horšího přežití u malobuněčného karcinomu plic, vaječníků, tlustého střeva, prsu a prostaty, stejně jako karcinom nosohltanu . Nadměrná exprese TOP2A je silným indikátorem špatné prognózy u rakoviny prostaty a karcinomu nosohltanu, jakož i v podskupině HER2 negativního karcinomu prsu . Několik studií zjistilo nadměrnou expresi TOP2A v HCC . Dosud však nebylo stanoveno, zda nadměrná exprese TOP2A v HCC vznikla z amplifikace genu TOP2A.

v této studii byl TOP2A významně nadměrně exprimován v nádorových tkáních HCC (), ale amplifikace genu TOP2A nebyla v těchto tkáních detekována, stejně jako žádná významná souvislost mezi expresí proteinu TOP2A a číslem kopie genu TOP2A. Na základě těchto výsledků jsme poprvé prokázali, že nadměrná exprese TOP2A v HCC nevznikla amplifikací genu TOP2A. Dříve některé studie týkající se rakoviny prostaty, rakoviny prsu a karcinomů žaludku také uváděly, že nadměrná exprese TOP2A úzce nesouvisí s amplifikací TOP2A, na rozdíl od silné korelace nadměrné exprese HER2 s amplifikací HER2 . Kromě toho, Schindlbeck et al. dospěl k závěru, že exprese proteinu TOP2A může být spíše cílem antracyklinu nezávislého na počtu kopií genu . Isaacs et al. ukázaly, že TOP2A je vysoce regulována na transkripční a translační úrovni, což naznačuje, že nadměrná exprese TOP2A může vzniknout z aberace na transkripční nebo translační úrovni. Dále Srikantan et al. nedávno identifikovali protein vázající RNA Hur a mikroRNA miR-548c-3p jako klíčové mediátory, které kontrolují hladiny exprese TOP2A a určují účinnost doxorubicinu .

podle našeho nejlepšího vědomí je tato zpráva první studií, která prokázala statisticky významnou souvislost mezi nadměrnou expresí TOP2A a HBsAg v séru (). Tato asociace však musí být validována vzhledem k relativně malé velikosti vzorku této studie a většina pacientů s HCC v této studii je HbsAg pozitivní. V současné studii byla také pozorována významná souvislost mezi nadměrnou expresí TOP2A a expresí Ki-67 v tkáních HCC (). Protein Ki-67 je lidský jaderný protein exprimovaný pouze v proliferujících buňkách během všech aktivních fází buněčného cyklu (fáze G1, S, G2 a M), ale ne v klidových buňkách (G0), zatímco exprese TOP2A je nedetekovatelná až do pozdní fáze S, vrcholila ve fázi G2-M a klesala, jak buňky dokončily mitózu . Exprese Ki-67 I TOP2A lze použít jako molekulární biomarkery buněčné proliferace u různých druhů rakoviny. Exprese TOP2A silně koreluje s expresí Ki-67 u karcinomu prsu . Navíc bylo zjištěno, že exprese Ki-67 koreluje s rychlostí růstu nádoru a špatnou prognózou v HCC .

nadměrná exprese TOP2A v HCC má prognostický význam. Watanuki et al. bylo zjištěno, že nadměrná exprese TOP2A v HCC se zdá být spojena s potenciálně agresivním fenotypem nádoru a smrtí související s rakovinou . Dále, Wong et al. uvádí se, že nadměrná exprese TOP2A u HCC koreluje s nástupem raného věku, kratšími dobami přežití a rezistencí na chemoterapii založenou na doxorubicinu . Proto jsou naléhavě zapotřebí nová chemoterapeutická činidla cílená na TOP2A s lepší účinností. Předpokládá se, že mechanismy rezistence na doxorubicin zahrnují indukci multidrogové rezistence (MDR) zprostředkované efluxními pumpami závislými na léčivu ATP, zejména ABCB1 (MDR1, Pgp) a ABCC1 (MRP1), jakož i souběžné zvýšení hladiny topoizomerázy i .detekce nadměrné exprese TOP2A v tkáních HCC by tedy mohla pomoci vybrat vhodné pacienty pro časné klinické studie nových terapeutických látek cílených na TOP2A, které by měly zahrnovat novou třídu inhibitorů topoizomerázy II s potenciálními schopnostmi rezistence na antimultidrug a duálními inhibitory topoizomerázy I a II.

v souhrnu jsme zjistili, že (1) HER2 nebyl amplifikován ani nadměrně exprimován jak v nádorových tkáních HCC, tak v netumorových tkáních; (2) nadměrná exprese TOP2A v nádorových tkáních HCC nevznikla z amplifikace genu TOP2A a byla nezávislá na amplifikaci genu HER2 nebo nadměrné expresi; a (3) nadměrná exprese TOP2A byla významně spojena s HBsAg v séru, stejně jako s expresí Ki-67. Pacienti s HCC s nadměrnou expresí TOP2A tak mohou být potenciálními kandidáty na nové terapeutické studie zaměřené na TOP2A.

střet zájmů

autoři prohlašují, že neexistuje žádný střet zájmů ohledně zveřejnění tohoto příspěvku.

poděkování

autoři děkují profesorovi Amnuayovi Thithapandhovi za pomoc při úpravách příspěvku. Finanční podpora této práce byla poskytnuta výzkumným grantem od Nadace Ramathibodi, Nemocnice Ramathibodi.

doplňkové materiály